Bugün öğrendim ki: DNA profilleme yöntemi, 1984 yılında Leicester Üniversitesi'nde çalışan İngiliz genetikçi Sir Alec Jeffreys tarafından keşfedilmiştir. DNA'nın bazı bölgelerinde her bireye özgü, oldukça değişken tekrarlayan diziler bulunduğunu fark ederek genetik parmak izi tekniğini geliştirmiştir.
Kalıtsal hastalıklar için DNA testleri hakkında Genetik testlere bakınız.
DNA özelliklerini kullanarak bireyleri tanımlamak için kullanılan teknik.
DNA fenotiplemesi ile karıştırılmamalıdır.
DNA profilleme (DNA parmak izi ve genetik parmak izi olarak da adlandırılır), bir bireyin deoksiribonükleik asit (DNA) özelliklerinin belirlenmesi işlemidir. Bir türü, bireyi değil, tanımlamak amacıyla yapılan DNA analizine DNA barkodlama denir.
DNA profilleme, ceza soruşturmalarında kullanılan bir adli tekniktir; suçluların profillerini DNA kanıtlarıyla karşılaştırarak suça karışma olasılıklarını değerlendirir.[1][2] Ayrıca babalık testlerinde,[3] göçmenlik uygunluğunu belirlemede,[4] soybilimsel ve tıbbi araştırmalarda da kullanılır. DNA profilleme aynı zamanda zooloji, botanik ve tarım alanlarında hayvan ve bitki popülasyonlarının incelenmesinde de kullanılmıştır.[5] DNA profilleme, İngiliz genetikçi Sir Alec Jeffreys tarafından 1984 yılında Leicester Üniversitesi'nde çalışırken keşfedildi. DNA'nın bazı bölgelerinin her bireye özgü son derece değişken tekrarlayan dizilere sahip olduğunu fark ederek genetik parmak izi tekniğini geliştirdi.
Arka plan
[düzenle]
1970'lerin ortalarından itibaren bilimsel ilerlemeler, DNA'nın bir bireyi tanımlamak için bir malzeme olarak kullanılmasına olanak sağladı. Adli tıp için DNA varyasyonunun doğrudan kullanımını kapsayan ilk patent (US5593832A[6]), Jeffrey Glassberg'in 1981'de Amerika Birleşik Devletleri'nde Rockefeller Üniversitesi'nde yaptığı çalışmalara dayanarak 1983'te ilk kez başvurulmuş olan başvurudan devamla 1997'de verildi.
İngiliz genetikçi Sir Alec Jeffreys, Leicester Üniversitesi Genetik Bölümü'nde çalışırken 1984'te bağımsız olarak bir DNA profilleme süreci geliştirdi. Jeffreys, bir DNA inceleyicisinin bilinmeyen DNA'da desenler oluşturabileceğini keşfetti. Bu desenler, ilişki analizini ilerletmek için kullanılabilecek kalıtsal özelliklerin bir parçasıydı. Bu keşifler, DNA profillemenin bir ceza davasında ilk kez kullanımına yol açtı.[7][8][9][10]
Jeffreys'in Adli Bilimler Servisi'nden (FSS) Peter Gill ve Dave Werrett ile birlikte geliştirdiği bu süreç, 1983 ve 1986'da Narborough, Leicestershire'da tecavüze uğrayıp öldürülen iki gencin cinayetinin çözülmesinde adli tıp açısından ilk kez kullanıldı. Dedektif David Baker liderliğindeki cinayet soruşturmasında, Leicestershire Polis Teşkilatı'na gönüllü olarak yardım eden yerel erkeklerden yaklaşık 5.000 kişiden gönüllü olarak alınan kan örneklerinde bulunan DNA, başlangıçta suçlardan birini itiraf eden ilk şüpheli olan Richard Buckland'ın aklanmasıyla ve ardından Colin Pitchfork'un 2 Ocak 1988'de mahkum edilmesiyle sonuçlandı. Yerel bir fırın çalışanı olan Pitchfork, kan örneği verirken iş arkadaşı Ian Kelly'yi kendisi yerine geçmesi için zorladı; Kelly daha sonra Pitchfork'a benzemek için sahte bir pasaport kullandı. Başka bir iş arkadaşı durumu polise bildirdi. Pitchfork tutuklandı ve kanı profil geliştirme ve işleme için Jeffreys'in laboratuvarına gönderildi. Pitchfork'un profili, cinayetlinin bıraktığı DNA ile eşleşti ve Pitchfork'un her iki olay yerinde de bulunduğunu doğruladı; her iki cinayeti de kabul etti.[11] Birkaç yıl sonra, Imperial Chemical Industries (ICI) adlı bir kimya şirketi, dünyaya ilk ticari olarak temin edilebilir kiti tanıttı. Görece yeni bir alan olmasına rağmen, hem ceza adaleti sistemi hem de toplum üzerinde önemli bir küresel etkisi oldu.[kaynak belirtilmeli]
İnsan DNA dizilerinin %99,9'u her insanda aynı olsa da, tek yumurta ikizleri olmadıkça bir bireyi diğerinden ayırt etmek için yeterli DNA farklılığı vardır.[12] DNA profilleme, özellikle kısa tandem tekrarlar (STR'ler), ayrıca mikrosatellitler ve minsatellitler olarak da bilinen, değişken sayıda tandem tekrarları (VNTR'ler) olarak adlandırılan, son derece değişken olan tekrarlayan dizileri kullanır. VNTR lokusları birbiriyle yakından ilişkili bireyler arasında benzerdir, ancak o kadar değişkendir ki ilişkisiz bireylerin aynı VNTR'lere sahip olması pek olası değildir.
VNTR'ler ve STR'ler öncesinde, Jeffreys gibi insanlar Kısıtlama Parçası Uzunluk Polimorfizmi (RFLP) adı verilen bir süreç kullandılar. Bu süreç, iki DNA örneği arasındaki farklılıkları analiz etmek için düzenli olarak DNA'nın büyük kısımlarını kullandı. RFLP, DNA profilleme ve analizinde kullanılan ilk teknolojilerden biriydi. Ancak teknoloji geliştikçe, STR gibi yeni teknolojiler ortaya çıktı ve RFLP gibi eski teknolojilerin yerini aldı.[13]
DNA kanıtlarının mahkemelerde kabul edilebilirliği Amerika Birleşik Devletleri'nde 1980'ler ve 1990'larda tartışmalıydı, ancak o zamandan beri tekniklerin gelişmesi nedeniyle daha evrensel olarak kabul görmeye başladı.[14]
Profilleme süreçleri
[düzenle]
DNA izolasyonu
[düzenle]
Ana madde: DNA izolasyonu
Kan veya tükürük gibi bir örnek alındığında, DNA numunede bulunanların yalnızca küçük bir kısmını oluşturur. DNA analiz edilebilmeden önce, hücrelerden izole edilmesi ve saflaştırılması gerekir. Bunun başarılmasının birçok yolu vardır, ancak tüm yöntemler aynı temel prosedürü izler. Hücre ve çekirdek zarlarının parçalanması gerekir, böylece DNA çözeltide serbest kalır. DNA serbest kaldığında, diğer tüm hücresel bileşenlerden ayrılabilir. DNA çözeltide ayrıldıktan sonra, kalan hücresel kalıntılar çözeltiden uzaklaştırılabilir ve atılabilir, geriye sadece DNA kalır. DNA izolasyonunun en yaygın yöntemleri organik izolasyon (fenol-kloroform izolasyonu olarak da adlandırılır),[15] Chelex izolasyonu ve katı faz izolasyonunu içerir. Diferansiyel izolasyon, iki farklı hücre türünden elde edilen DNA'nın saflaştırılmadan önce birbirinden ayrılabildiği bir izolasyon modifikasyonudur. Her izolasyon yöntemi laboratuvarda iyi çalışır, ancak analistler tipik olarak tercih ettikleri yöntemi maliyet, harcanan zaman, elde edilen DNA miktarı ve elde edilen DNA'nın kalitesi gibi faktörlere göre seçerler.[16][17]
RFLP analizi
[düzenle]
RFLP, kısıtlama parçası uzunluk polimorfizmi anlamına gelir ve DNA analizi açısından, DNA'yı örnek boyunca kısa ve spesifik dizilerde "kesmek" için kısıtlama enzimleri kullanan bir DNA test yöntemini tanımlar. Laboratuvarda işlemeye başlamak için, örneğin numune türüne veya laboratuvar SOP'lerine (Standart İşletme Prosedürleri) bağlı olarak değişebilen bir izolasyon protokolünden geçmesi gerekir. DNA hücrelerden "izole edilip" harici hücresel materyallerden ve DNA'yı bozabilecek nükleazlardan ayrıldıktan sonra, örnek kesilip ayırt edilebilir parçalara ayrılması için istenen kısıtlama enzimleri ile birleştirilebilir. Enzim sindirimini takiben bir Southern Blot yapılır. Southern Blot'lar, radyoaktif veya kemilüminesan problarla jel üzerinde gerçekleştirilen boyut tabanlı bir ayırma yöntemidir. RFLP, tek lokuslu veya çok lokuslu problarla (DNA üzerinde tek bir konumu veya birden fazla konumu hedefleyen problar) gerçekleştirilebilir. Çok lokuslu probların dahil edilmesi analiz için daha yüksek ayrım gücü sağladı, ancak bu sürecin tamamlanması, probların görselleştirilmesi için gereken her adımın aşırı zaman alması nedeniyle tek bir numune için birkaç günden bir haftaya kadar sürebilir.
Ana madde: Kısıtlama Parçası Uzunluk Polimorfizmi
Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) analizi
[düzenle]
Bu teknik 1983'te Kary Mullis tarafından geliştirildi. PCR, çeşitli uygulamalar için tıbbi ve biyolojik araştırma laboratuvarlarında yaygın ve önemli bir tekniktir.[18]
PCR veya Polimeraz Zincir Reaksiyonu, belirli bir DNA dizisini çoğaltmak için yaygın olarak kullanılan bir moleküler biyoloji tekniğidir.
Çoğaltma, üç adımdan oluşan bir dizi ile elde edilir:
1- Denatürasyon: Bu adımda, DNA, çift sarmallı DNA'nın tamamlayıcı baz çiftleri arasındaki hidrojen bağlarını ayırmak için 95 °C'ye ısıtılır.
2- Tavlanma: Bu aşamada reaksiyon 50-65 °C'ye soğutulur. Bu, primerlerin hidrojen bağı yoluyla tek sarmallı kalıp DNA üzerindeki belirli bir bölgeye bağlanmasını sağlar.
3- Uzama: Bu adımda genellikle termostabil bir DNA polimeraz olan Taq polimeraz kullanılır. Bu, 72 °C'de yapılır. DNA polimeraz, nükleotidleri 5'-3' yönünde ekler ve DNA kalıbının tamamlayıcı sarmalını sentezler.
Ana madde: Polimeraz Zincir Reaksiyonu
STR analizi
[düzenle]
Ana madde: STR analizi
Günümüzde kullanılan DNA profilleme sistemi, polimeraz zincir reaksiyonuna (PCR) dayanır ve basit dizileri kullanır.[8]
Ülkeden ülkeye, farklı STR tabanlı DNA profilleme sistemleri kullanılmaktadır. Kuzey Amerika'da, CODIS 20[20] çekirdek lokuslarını çoğaltan sistemler neredeyse evrenseldir, Birleşik Krallık'ta ise DNA-17 lokus sistemi kullanılmaktadır ve Avustralya 18 çekirdek belirteç kullanır.[21]
STR analizinin gerçek gücü, istatistiksel ayrım gücünde yatar. Çünkü CODIS'te ayrım için şu anda kullanılan 20 lokus bağımsız olarak ayrılır (bir lokustaki belirli bir tekrar sayısına sahip olmak, başka bir lokustaki herhangi bir tekrar sayısına sahip olma olasılığını değiştirmez), olasılıkların çarpım kuralı uygulanabilir. Bu, birinin ABC DNA tipine sahip olması durumunda, üç lokusun bağımsız olması koşuluyla, o bireyin o DNA tipine sahip olma olasılığının A tipine sahip olma olasılığı çarpı B tipine sahip olma olasılığı çarpı C tipine sahip olma olasılığı olduğu anlamına gelir. Bu, beş yüz katrilyon (1x1018) veya daha fazla eşleşme olasılığı üretme yeteneği ile sonuçlanmıştır.[daha fazla açıklama gerekli] Ancak, DNA veritabanı aramaları beklenenden çok daha sık yanlış DNA profili eşleşmeleri gösterdi.[22]
Y-kromozomu analizi
[düzenle]
Babaya bağlı kalıtım nedeniyle, Y-haplotipleri erkek popülasyonunun genetik kökeni hakkında bilgi sağlar. Bu popülasyon tarihini araştırmak ve ceza davalarında haplotip frekansları için tahminler sağlamak amacıyla, 2000 yılında çevrimiçi bir kaynak olarak "Y haplotip referans veritabanı (YHRD)" oluşturulmuştur. Şu anda dünya çapındaki popülasyonlardan 300.000'den fazla minimal (8 lokuslu) haplotip içermektedir.[23]
Mitozomal analiz
[düzenle]
Ana madde: Mitozomal DNA
mtDNA, saç telleri ve eski kemikler/dişler gibi materyallerden elde edilebilir.[24] Veri ile etkileşim noktasına dayalı kontrol mekanizması. Bu, numunedeki araç yerleşimi ile belirlenebilir.[25]
Profilleme uygulamaları
[düzenle]
DNA profilleme, mikrobiyal, fungal, bitki ve hayvan bireylerinin tanımlanmasında uygulanmıştır. PCR'nin rastgele çoğaltılmış DNA gibi bir varyantı, DNA parmak izi uygulamalarında özellikle yararlı olmuştur. Örneğin, rastgele çoğaltılmış polimorfik DNA (RAPD), rastgele astarlanmış PCR (AP-PCR), DNA çoğaltma parmak izi (DAF) rastgele primerler kullanarak bir genomdaki anonim bölgeleri hedefleyerek benzersiz genetik parmak izleri üretir. Bu rastgele çoğaltılmış yöntemler, bakteri ve bitkilerin parmak izi çıkarılmasında yaygın olarak kullanılmış, adli tıp, ıslah ve popülasyon genetiği analizlerine yardımcı olmuştur. Benzer şekilde, yaygın olarak kullanılan çoğaltılmış parça uzunluğu polimorfizmi (AFLP) tekniği, geniş bir organizma yelpazesi için DNA profillemesi amacıyla anonim bölgeleri hedeflemek üzere kısıtlama enzimleri ve PCR çoğaltımının bir kombinasyonunu kullanır. Yüksek verimli dizilemenin ortaya çıkmasıyla birlikte, kısıtlama bölgesi ilişkili DNA dizileme (RAD-seq) gibi indirgenmiş temsil dizileme yöntemleri, geniş bir uygulama yelpazesi için genom çapında belirteç keşfine ve genotiplemeye olanak tanır.
Örneğin bitki parmak izi çıkarmada moleküler belirteç tekniklerinin kullanılması, çeşitlerin ve erişimlerin tanımlanmasına olanak tanır. Bunların kullanımı, Ticaretle Bağlantılı Fikri Mülkiyet hakları (TRIPS) ve Biyolojik Çeşitlilik Sözleşmesi (CBD) nedeniyle ilgi görmektedir.[26] Özellikle tıbbi bitkilerin DNA parmak izi çıkarılması, bitkilerdeki fitokomponentlerin ve tağşişlerin tanımlanmasına, doğrulanmasına, ayırt edilmesine ve tespit edilmesine olanak tanır.[27] DNA profilleme, farmakognozdaki bilimsel çalışmanın geleceğini belirleyen bu uygulamalar için kritik hale gelmektedir.[27] Teknikler ayrıca yavruların başarısını artırması muhtemel olan tohum boyutu ve yaprak rengi gibi özelliklerin belirlenmesine de yardımcı olur.[28]
Adli DNA örnekleriyle ilgili sorunlar
[düzenle]
İnsanlar DNA analizini düşündüklerinde, genellikle NCIS veya CSI gibi televizyon şovlarını akıllarına getirirler; bu şovlar, DNA örneklerinin bir laboratuvara gelip anında analiz edildiğini ve ardından dakikalar içinde şüphelinin resminin ekrana getirildiğini tasvir eder. Ancak gerçeklik oldukça farklıdır ve olay yerlerinden genellikle mükemmel DNA örnekleri toplanmaz. Cinayet kurbanları, bulunduklarında genellikle zorlu koşullara maruz kalırlar ve suç işlemek için kullanılan nesnelere genellikle birden fazla kişi dokunmuştur. Adli bilim insanlarının DNA örneklerini analiz ederken karşılaştıkları en yaygın iki sorun bozulmuş örnekler ve DNA karışımlarıdır.[29]
Bozulmuş DNA
[düzenle]
Modern PCR yöntemleri var olmadan önce, bozulmuş DNA örneklerini analiz etmek neredeyse imkansızdı. Adli bilimlerde DNA analizi için kullanılan ilk teknik olan kısıtlama parçası uzunluk polimorfizmi (RFLP) gibi yöntemler, güvenilir veri elde etmek için numunede yüksek moleküler ağırlıklı DNA gerektiriyordu. Ancak, yüksek moleküler ağırlıklı DNA, DNA'nın çok parçalanmış olması nedeniyle RFLP'yi doğru bir şekilde yürütmek için yetersiz olduğu için bozulmuş örneklerde eksiktir. Yalnızca polimeraz zincir reaksiyonu teknikleri icat edildiğinde bozulmuş DNA örneklerinin analizi yapılabilir hale geldi. Özellikle Multipleks PCR, bozulmuş örneklerde kalan küçük DNA parçalarını izole etmeyi ve çoğaltmayı mümkün kıldı. Multipleks PCR yöntemleri RFLP gibi eski yöntemlerle karşılaştırıldığında büyük bir fark görülebilir. Multipleks PCR teorik olarak 1 ng'den az DNA'yı çoğaltabilir, ancak RFLP'nin analiz yapabilmesi için en az 100 ng DNA'ya ihtiyacı vardı.[30]
Düşük şablonlu DNA
[düzenle]
Düşük şablonlu DNA, bir numunede 0,1 ng([31])'den az DNA olduğunda ortaya çıkabilir. Bu, allelik düşüş veya allelik artış gibi daha fazla stokastik etkiye (rastgele olaylar) yol açabilir ve bu da bir DNA profilinin yorumunu değiştirebilir. Bu stokastik etkiler, heterozigot bir bireyden gelen 2 alelin eşit olmayan çoğaltılmasına yol açabilir. Düşük şablonlu DNA ile uğraşırken buna özellikle dikkat etmek önemlidir, çünkü karışım içerisindeki katkıda bulunanlardan birinin veya daha fazlasının, PCR reaksiyonunun düzgün çalışması için optimal miktardan daha az DNA'ya sahip olması daha olasıdır.[32] Bu nedenle, DNA profili yorumu için stokastik eşikler geliştirilmiştir. Stokastik eşik, düşüşün meydana geldiği bir elektroferogramda görülen minimum tepe yüksekliğidir (RFU değeri). Tepe yüksekliği değeri bu eşiğin üzerindeyse, allelik düşüşün meydana gelmediğini varsaymak makul olacaktır. Örneğin, elektroferogramda belirli bir lokus için yalnızca 1 tepe görülüyorsa ancak tepe yüksekliği stokastik eşiğin üzerindeyse, bu bireyin homozigot olduğunu ve düşük şablonlu DNA nedeniyle kaybolacak olan heterozigot partner alelinin eksik olmadığını makul bir şekilde varsayabiliriz. Düşük şablonlu DNA olduğunda allelik düşüş meydana gelebilir çünkü başlangıçta o kadar az DNA vardır ki, bu lokusta DNA örneğinin (veya karışımının) katkıda bulunanı gerçek bir heterozigottur ancak diğer alel çoğaltılmaz ve bu nedenle düşük şablonlu DNA nedeniyle kaybolur. Düşük şablonlu DNA olduğunda allelik artış da meydana gelebilir çünkü bazen tıkaç tepe amplifiye edilebilir. Tıkaç, PCR'nin bir eseridir. PCR reaksiyonu sırasında, DNA Polimeraz gelir ve primerlerin ötesine nükleotidler ekler, ancak tüm bu süreç çok dinamiktir, bu da DNA Polimerazın sürekli bağlandığı, ayrıldığı ve sonra yeniden bağlandığı anlamına gelir. Bu nedenle, DNA Polimeraz bazen kendisinden bir tekrar daha kısa olan bir kısa tandem tekrar oluşturarak ilerideki kısa tandem tekrara yeniden bağlanır. PCR sırasında, DNA Polimerazın bir lokusa tıkaç halinde bağlanıp çok sayıda kopya oluşturmak için çoğaltmaya başlaması durumunda, bu tıkaç ürünü elektroferogramda rastgele görünecek ve allelik artışa yol açacaktır.
MiniSTR analizi
[düzenle]
Ana madde: STR analizi
Yoğun yangınlar veya yalnızca kemik parçaları kaldığında olduğu gibi DNA örneklerinin bozulduğu durumlarda, bu örnekler üzerinde standart STR testi yetersiz olabilir. Yüksek derecede bozulmuş örnekler üzerinde standart STR testi yapıldığında, daha büyük STR lokusları genellikle kaybolur ve yalnızca kısmi DNA profilleri elde edilir. Kısmi DNA profilleri güçlü bir araç olabilir, ancak rastgele eşleşme olasılığı tam bir profil elde edildiğinden daha büyüktür. Bozulan DNA örneklerini analiz etmek için geliştirilen bir yöntem, miniSTR teknolojisini kullanmaktır. Yeni yaklaşımda, primerler STR bölgesine daha yakın bağlanmak üzere özel olarak tasarlanır.[34]
Normal STR testinde, primerler STR bölgesini segmentin içinde barındıran daha uzun dizilere bağlanır. Bununla birlikte, MiniSTR analizi yalnızca STR konumunu hedefler, bu da çok daha küçük bir DNA ürünü ile sonuçlanır.[34]
Primerleri gerçek STR bölgelerine daha yakın yerleştirerek, bu bölgenin başarılı bir şekilde çoğaltılma şansı daha yüksektir. Bu STR bölgelerinin başarılı bir şekilde çoğaltılması artık gerçekleşebilir ve daha eksiksiz DNA profilleri elde edilebilir. Daha küçük PCR ürünlerinin yüksek derecede bozulmuş örneklerle daha yüksek başarı oranı ürettiği başarısı, ilk olarak 1995'te, miniSTR teknolojisinin Waco yangını kurbanlarını tanımlamak için kullanıldığı zaman bildirildi.[35]
DNA karışımları
[düzenle]
Karışımlar, adli bilim insanlarının bilinmeyen veya şüpheli DNA örneklerini analiz ederken karşılaştıkları bir başka yaygın sorundur. Bir karışım, iki veya daha fazla bireysel katkıda bulunan içeren bir DNA örneği olarak tanımlanır.[30] Bu, genellikle bir DNA örneği birden fazla kişinin dokunduğu bir öğeden sürüntü alındığında veya bir örnek hem kurbanın hem de saldırganın DNA'sını içerdiğinde meydana gelebilir. Bir DNA örneğinde birden fazla bireyin bulunması, bireysel profillerin tespit edilmesini zorlaştırabilir ve karışımların yorumlanması yalnızca yüksek eğitimli kişiler tarafından yapılmalıdır. İki veya üç birey içeren karışımlar zorlukla yorumlanabilir. Dört veya daha fazla birey içeren karışımlar, bireysel profiller elde etmek için çok karmaşıktır. Bir karışımın genellikle elde edildiği yaygın bir senaryo, cinsel saldırı vakasıdır. Kurbanın, kurbanın rızasıyla cinsel partnerlerinin ve fail(ler)in materyalini içeren bir örnek toplanabilir.[36]
Karışımlar genellikle Üç kategoriye ayrılabilir: Tip A, Tip B ve Tip C.[37] Tip A karışımları, katkıda bulunanların birbirinden ayırt edilemediği, etrafında benzer tepe yüksekliklerine sahip alellere sahiptir. Tip B karışımları, hangi alellerin birlikte verildiğini belirlemek için tepe yüksekliği oranları karşılaştırılarak çözülebilir. Tip C karışımları, örneklerin DNA bozulmasından veya mevcut DNA miktarının çok az olmasından etkilendiği için mevcut teknolojiyle güvenli bir şekilde yorumlanamaz.
Bir elektroferograma bakıldığında, daha az karmaşık karışımlardaki katkıda bulunan sayısını, her lokustaki tepe sayısına göre belirlemek mümkündür. Her lokusta yalnızca bir veya iki tepe olacak tek kaynaklı bir profile kıyasla, bir karışım iki veya daha fazla lokusta üç veya daha fazla tepe olduğunda görülür.[38] Yalnızca tek bir lokusta üç tepe varsa, o lokusta tri-alelik olan tek bir katkıda bulunan olması mümkündür.[39] İki kişilik karışımlar her lokusta iki ila dört tepeye sahip olacak ve üç kişilik karışımlar her lokusta üç ila altı tepeye sahip olacaktır. Karışımlar, katkıda bulunan sayısı arttıkça çözünmesi o kadar zorlaşır.
DNA profilleme yöntemleri ilerledikçe, adli bilim insanları daha fazla DNA örneğiyle karşılaşmaktadır, çünkü en küçük katkıda bulunan bile artık modern testlerle tespit edilebilmektedir. Adli bilim insanlarının DNA karışımlarını yorumlama kolaylığı büyük ölçüde her bireyden elde edilen DNA oranına, genotip kombinasyonlarına ve çoğaltılan toplam DNA miktarına bağlıdır.[40] Bir karışımın yorumlanıp yorumlanamayacağını belirlemede bakılacak en önemli husus genellikle DNA oranıdır. Örneğin, bir DNA örneğinde iki katkıda bulunan olsaydı, bir kişinin katkıda bulunduğu DNA oranı diğer kişiden çok daha yüksek olsaydı bireysel profilleri yorumlamak kolay olurdu. Bir örnekte üç veya daha fazla katkıda bulunan olduğunda, bireysel profilleri belirlemek son derece zor hale gelir. Neyse ki, olasılıksal genotiplemedeki gelişmeler gelecekte bu tür bir belirlemeyi mümkün kılabilir. Olasılıksal genotipleme, bir karışımdaki bireysel genotiplerin istatistiksel olasılıklarını üretmek için binlerce matematiksel hesaplama yürüten karmaşık bilgisayar yazılımları kullanır.[41]
DNA veritabanları
[düzenle]
Ana madde: Ulusal DNA veritabanı
Bir DNA veritabanının erken bir uygulaması, 1996'dan 1999'a kadar Kevin W. P. Miller ve John L. Dawson tarafından Cambridge Üniversitesi'nde Miller'ın Doktora tezinin bir parçası olarak toplanan verilerden hazırlanan bir Mitozomal DNA Uyumluluğuydu.[42][43] Şu anda dünya çapında birkaç DNA veritabanı bulunmaktadır. Bazıları özeldir, ancak en büyük veritabanlarının çoğu hükümet kontrolündedir. Amerika Birleşik Devletleri, Mayıs 2018 itibarıyla 13 milyondan fazla kayıt tutan Birleşik DNA Dizin Sistemi (CODIS) ile en büyük DNA veritabanını elinde tutmaktadır.[44] Birleşik Krallık, daha küçük nüfusa rağmen benzer büyüklükte olan Ulusal DNA Veritabanı'nı (NDNAD) sürdürmektedir. Bu veritabanının büyüklüğü ve büyüme hızı, polisin örnek alma ve hatta beraat durumunda bile bunları saklama konusunda geniş yetkilere sahip olduğu Birleşik Krallık'taki sivil özgürlük grupları için endişe kaynağı olmaktadır.[45] Muhafazakar-Liberal Demokrat koalisyonu, 2012 tarihli Özgürlüklerin Korunması Yasası'nın 1. bölümü ile bu endişelerin bir kısmını, şüpheliler beraat ederse veya suçlanmazsa, DNA örneklerinin belirli (çoğunlukla ciddi veya cinsel) suçlarla ilgili olmadığı sürece silinmesi gerektiği hükmüyle ele aldı. Gelişmiş adli tıp tekniklerinin (kamuya açık genetik veritabanları ve DNA fenotipleme yaklaşımları kullanan genetik soybilim gibi) tanıtımı etrafındaki kamusal tartışmalar sınırlı, kopuk, odaklanmamış olup, gizlilik ve rıza sorunlarını gündeme getirmekte ve ek yasal korumaların oluşturulmasını gerektirebilir.[46]
Amerika Birleşik Devletleri'ndeki ABD Vatanseverlik Yasası, ABD hükümetinin şüpheli teröristlerden DNA örnekleri alması için bir yol sağlar. Suçlardan elde edilen DNA bilgileri toplanır ve FBI tarafından sürdürülen CODIS veritabanına yatırılır. CODIS, kolluk kuvvetlerinin suçlardan elde edilen DNA örneklerini veritabanındaki eşleşmelere karşı test etmesine olanak tanıyarak, toplanan DNA kanıtlarıyla ilişkili belirli biyolojik profilleri bulmak için bir araç sağlar.[47]
Ulusal bir DNA bankasından bir suç mahallini veritabanına bir DNA örneği vermiş bir faile bağlamak için bir eşleşme yapıldığında, bu bağlantıya genellikle soğuk vuruş denir. Bir soğuk vuruş, polisin bir şüpheliye yönlendirilmesi açısından değerlidir, ancak DNA Veri Bankası dışından yapılan bir DNA eşleşmesinden daha az delil değeri taşır.[48]
FBI ajanları, suçu hüküm giymemiş bir kişinin DNA'sını yasal olarak saklayamaz. Daha sonra hüküm giymeyen bir şüpheliden toplanan DNA imha edilmeli ve veritabanına girilmemelidir. 1998'de Birleşik Krallık'ta ikamet eden bir adam, hırsızlık suçlamasıyla tutuklandı. DNA'sı alındı ve test edildi, daha sonra serbest bırakıldı. Dokuz ay sonra, bu adamın DNA'sı kaza sonucu ve yasa dışı bir şekilde DNA veritabanına girildi. Yeni DNA, soğuk vakalarda bulunan DNA ile otomatik olarak karşılaştırıldı ve bu durumda, bu adam bir yıl önce bir tecavüz ve saldırı davasında bulunan DNA ile eşleşti. Hükümet daha sonra onu bu suçlardan dolayı kovuşturdu. Yargılama sırasında, yasa dışı olarak veritabanına girildiği için DNA eşleşmesinin kanıtlardan çıkarılması talep edildi. Talep yerine getirildi.[49] Tecavüz kurbanlarından toplanan failin DNA'sı, bir eşleşme bulunana kadar yıllarca saklanabilir. 2014'te, bu sorunu ele almak için Kongre, eyaletlerin bir "birikmiş" kanıtlarla başa çıkmasına yardımcı olan bir yasa tasarısını uzattı.[50]
Bitkilerde DNA profilleme veritabanları:
PIDS:
PIDS (Plant International DNA-Fingerprinting System), açık kaynaklı bir web sunucusu ve ücretsiz yazılım tabanlı uluslararası bitki DNA parmak izi sistemidir.
Mikrosatellit DNA parmak izi verilerinin büyük bir miktarını yönetir, genetik çalışmalar yapar ve insan hatasını azaltırken verimliliği artırarak koleksiyon, depolama ve bakımı otomatikleştirir.
Sistem, bitki ıslahçıları, adli tıp ve insan parmak izi tanıma için değerli bir araç haline getiren belirli laboratuvar ihtiyaçlarına göre uyarlanabilir.
Deneyleri takip eder, verileri standartlaştırır ve veritabanları arası iletişimi teşvik eder.
Ayrıca varyete kalitesinin düzenlenmesine, varyete haklarının korunmasına ve ıslahda moleküler belirteçlerin kullanımına konum istatistikleri, birleştirme, karşılaştırma ve genetik analiz fonksiyonu sağlayarak yardımcı olur.[51]
DNA kanıtlarının değerlendirilmesindeki hususlar
[düzenle]
RFLP kullanılırken, tesadüfi bir eşleşmenin teorik riski 100 milyarda 1 (100.000.000.000'de 1) iken, tek yumurta ikizleri insan popülasyonunun %0,2'sini oluşturduğu için pratik risk 1.000'de 1'dir.[52] Dahası, laboratuvar hatası oranı neredeyse kesinlikle bundan daha yüksektir ve gerçek laboratuvar prosedürleri genellikle tesadüf olasılıklarının hesaplandığı teoriye yansımaz. Örneğin, tesadüf olasılıkları, iki numunedeki belirteçlerin tam olarak aynı konumda bantlara sahip olma olasılıklarına dayanarak hesaplanabilir, ancak bir laboratuvar çalışanı benzer ancak tam olarak aynı olmayan bant desenlerinin, agaroz jelde bazı kusurlarla özdeş genetik örneklerden kaynaklandığı sonucuna varabilir. Ancak bu durumda, eşleşme ilan etme kriterlerini genişleterek laboratuvar çalışanı tesadüf riskini artırır. 2000'lerde yapılan çalışmalar, nispeten yüksek hata oranları bildirmiştir, bu da endişe kaynağı olabilir.[53] Genetik parmak izinin ilk günlerinde, doğru bir eşleşme olasılığını hesaplamak için gereken nüfus verileri bazen mevcut değildi. 1992 ile 1996 yılları arasında, teorik olarak hesaplanan daha yüksek olanların yerine, RFLP analizinde kullanılan eşleşme olasılıklarına tartışmalı bir şekilde keyfi-düşük sınırlar konuldu.[54]
Genetik ilişki kanıtı
[düzenle]
DNA profillemenin genetik ilişkinin kanıtı olarak kullanılması mümkündür, ancak böyle bir kanıtın gücü zayıftan pozitife doğru değişir. İlişkinin olmadığını gösteren test kesindir. Ayrıca, neredeyse tüm bireyler tek ve belirgin bir gen setine sahipken, "kimeras" olarak bilinen aşırı nadir bireyler en az iki farklı gen setine sahiptir. Bir annenin çocuklarıyla ilişkili olmadığını yanlış bir şekilde öne süren iki DNA profilleme vakası olmuştur.[55]
Sahte DNA kanıtı
[düzenle]
Genlerin ve kodlama dizilerinin (açık okuma çerçeveleri [ORF'ler]) işlevsel analizi genellikle her ORF'nin ifade edilmesini, kodlanan proteinin saflaştırılmasını, antikorların üretilmesini, fenotiplerin incelenmesini, hücre içi lokalizasyonun belirlenmesini ve diğer proteinlerle etkileşimlerin araştırılmasını gerektirir.[56] Yaşam bilimi şirketi Nucleix tarafından yürütülen ve Forensic Science International dergisinde yayınlanan bir çalışmada, bilim insanları, o kişiden gerçek doku elde etmeden standart moleküler biyoloji teknikleri kullanılarak istenen herhangi bir genetik profile uyan bir in vitro sentezlenmiş DNA örneğinin oluşturulmasının mümkün olduğunu buldular.
Ceza davalarında DNA kanıtları
[düzenle]
Ailevi DNA araması
[düzenle]
Ailevi DNA araması (bazen "ailevi DNA" veya "ailevi DNA veritabanı araması" olarak anılır), bir suç mahalliinde bulunan DNA kanıtının (adli profil), eyalet DNA veritabanındaki mevcut bir DNA profiliyle (fail profili) güçlü bir şekilde benzer olduğu, ancak tam bir eşleşme olmadığı durumlarda yeni araştırma ipuçları oluşturma uygulamasıdır.[57][58] Diğer tüm ipuçları tükendikten sonra, araştırmacılar, eyaletin DNA veritabanındaki tüm profilleri adli profille karşılaştırarak, adli profildeki DNA'ya sahip bireyin çok yakın bir akrabası olma olasılığı en yüksek olan ve halihazırda veritabanında bulunan failleri listelemek için özel olarak geliştirilmiş yazılımlar kullanabilirler.[59]
Ailevi DNA veritabanı araması, Birleşik Krallık'ta 4 Temmuz 2003'te Lynette White cinayetinden Jeffrey Gafoor'un mahkumiyetine yol açan bir soruşturmada ilk kez kullanıldı. DNA kanıtı, 1988'deki cinayet sırasında 14 yaşında olan Gafoor'un yeğeniyle eşleşti. 2004'te,[60] bir otoyol köprüsünden bir tuğla atıp bir kamyon sürücüsünü öldüren bir adamı bulmak için tekrar kullanıldı. Tuğla üzerinde bulunan DNA, günün erken saatlerinde bir araba hırsızlığı olay yerinde bulunan DNA ile eşleşti, ancak ulusal DNA veritabanında iyi bir eşleşme yoktu. Daha geniş bir arama, potansiyel bir eşleşmeyle karşılaştı ve sorgulandığında, bu kişi, orijinal olay mahallinin çok yakınında yaşayan bir erkek kardeşi olan Craig Harman'ı ortaya çıkardı. Harman gönüllü olarak bir DNA örneği verdi ve tuğla üzerindeki örnekle eşleştiğinde suçu kabul etti.[61] 2011 itibarıyla, ailevi DNA veritabanı araması, eyaletlerin ailevi aramaları nasıl ve ne zaman yapacaklarını belirlediği Amerika Birleşik Devletleri'nde ulusal düzeyde yapılmamaktadır. Ailevi bir arama ile ardından gelen mahkumiyetin ilk kez Amerika Birleşik Devletleri'nde gerçekleştirildiği Denver, Colorado'da 2008'de, Denver Bölge Savcısı Mitch Morrissey ve Denver Polis Departmanı Suç Laboratuvarı Direktörü Gregg LaBerge liderliğinde geliştirilen yazılım kullanılarak yapıldı.[62] Kaliforniya, o zamanki Başsavcı Jerry Brown'ın (daha sonra Vali oldu) ailevi arama için bir politika uygulayan ilk eyaletti.[63] Kaliforniya Adalet Bakanlığı'nın Ailevi Arama Çalışma Grubu'na danışman olarak eski Alameda Bölge Savcısı Rock Harmon, Kaliforniya'da ailevi arama teknolojisinin benimsenmesinin katalizörü olarak kabul edilir.[64] Teknik, 2010'da "Grim Sleeper" olarak bilinen Los Angeles seri katilini yakalamak için kullanıldı.[64] Kolluk kuvvetlerini yirmi yılı aşkın bir süredir polisten kaçan "Grim Sleeper" seri katilinin kimliğine yönlendiren bir görgü tanığı veya muhbiri değil, şüphelinin kendi oğlunun DNA'sıydı. Şüphelinin oğlu, bir yıl önce bir ağır suç davasıyla tutuklanmış ve DNA örneği alınmıştı. DNA'sı hükümlü suçluların veritabanına girdiğinde, dedektifler "Grim Sleeper" suç mahallerinde bulunan kanıtlara kısmi bir eşleşme konusunda uyarıldılar. Grim Sleeper olarak da bilinen David Franklin Jr., on cinayet ve bir tecavüz girişimi suçlamasıyla karşı karşıya kaldı.[65] Daha yakın zamanda, ailevi DNA, 2008'de Santa Cruz'da bir kadının cinsel saldırısı ve alıkonulması suçlamalarıyla ilgili 21 yaşındaki Elvis Garcia'nın tutuklanmasına yol açtı.[66] Mart 2011'de Virginia Valisi Bob McDonnell, Virginia'nın ailevi DNA aramaları kullanmaya başlayacağını duyurdu.[67]
7 Mart 2011'de Virginia'da Doğu Yakası Tecavüzcüsü hakkında düzenlediği basın toplantısında, Prens William Bölgesi savcısı Paul Ebert ve Fairfax County Polis Dedektifi John Kelly, Virginia ailevi DNA araması kullansaydı davanın yıllar önce çözüleceğini söylediler. Aaron Thomas, şüpheli Doğu Yakası Tecavüzcüsü, Virginia'dan Rhode Island'a kadar 17 kadının tecavüzüyle bağlantılı olarak tutuklandı, ancak vakada ailevi DNA kullanılmadı.[68]
Ailevi DNA veritabanı aramalarının eleştirmenleri, tekniğin bireyin 4. Anayasa değişikliği haklarının bir ihlali olduğunu savunmaktadır.[69] Gizlilik savunucuları, faillerin veya tutukluların akrabalarına olası DNA eşleşmeleri aramanın tek adil yolunun nüfus çapında bir DNA veritabanı oluşturmak olacağını savunarak DNA veritabanı kısıtlamaları için dilekçe vermektedir.[49] Bazı akademisyenler, ailevi arama ile ilgili gizlilik endişelerinin, diğer polis arama teknikleriyle bazı açılardan benzer olduğunu belirtmişlerdir[70] ve çoğu, uygulamanın anayasaya uygun olduğu sonucuna varmıştır.[71] Amerika Birleşik Devletleri'ndeki Dokuzuncu Daire Temyiz Mahkemesi, ABD - Pool davasında (teorik olarak geçersiz kılındı), bu uygulamanın bir tanığın bir kişinin fotoğrafına bakıp failine benzediğini söylemesine bir ölçüde benzediğini öne sürdü, bu da kolluk kuvvetlerinin tanığa benzer görünen bireylerin fotoğraflarını göstermesine yol açar ve bunlardan biri fail olarak tanımlanır.[72]
Eleştirmenler ayrıca ailevi DNA testinden dolayı ırksal profillemenin meydana gelebileceğini de belirtmektedirler. Amerika Birleşik Devletleri'nde, ırksal azınlıkların mahkumiyet oranları genel nüfusa göre çok daha yüksektir. Bunun, azınlıklar arasında basit bir yüksek suç oranı yerine polis memurları ve mahkemelerden kaynaklanan ayrımcılıktan mı kaynaklandığı belirsizdir. Amerika Birleşik Devletleri'ndeki eyaletlerin çoğunda bulunan tutuklama tabanlı veritabanları, daha da büyük bir ırksal ayrımcılık düzeyine yol açmaktadır. Bir tutuklama, mahkumiyetin aksine, polis takdirine daha ağır dayanır.[49]
Örneğin, Denver Bölge Savcılığı'ndaki araştırmacılar, bir mülk hırsızlığı davasında bir şüpheliyi ailevi bir DNA araması kullanarak başarıyla teşhis ettiler. Bu örnekte, suç mahalliinde bırakılan şüphelinin kanı, mevcut bir Colorado Düzeltme Departmanı mahkûmununkine güçlü bir şekilde benziyordu.[62]
Kısmi eşleşmeler
[düzenle]
Kısmi DNA eşleşmeleri, her lokusta en az bir aleli paylaşan potansiyel bir eşleşme üreten orta düzeyde bir CODIS aramalarının sonucudur.[73] Kısmi eşleştirme, Birleşik Krallık ve Amerika Birleşik Devletleri'nde kullanılanlar gibi ailevi arama yazılımlarının veya ek Y-STR analizinin kullanılmasını içermez ve bu nedenle genellikle kardeş ilişkilerini kaçırır. Kısmi eşleştirme, her iki ülkede de birkaç vakada şüphelileri teşhis etmek için kullanılmış[74] ve ayrıca haksız yere suçlananları aklamak için bir araç olarak kullanılmıştır. Darryl Hunt, 1984'te Kuzey Carolina'da genç bir kadının tecavüzü ve cinayetiyle bağlantılı olarak yanlış bir şekilde mahkum edildi.[75]
Gizli DNA toplama
[düzenle]
Polis teşkilatları, bir şüphelinin bilgisi olmadan DNA örnekleri toplayabilir ve bunları kanıt olarak kullanabilir. Uygulamanın yasallığı Avustralya'da sorgulanmıştır.[76]
Kabul edildiği Amerika Birleşik Devletleri'nde, mahkemeler genellikle gizlilik beklentisi olmadığına karar verir ve Anayasa Mahkemesi'nin 1988'de California - Greenwood davasında, Dördüncü Anayasa Değişikliği'nin evin sınırları dışına toplanmak üzere bırakılan çöplerin jarrantsız aranmasını ve el konulmasını yasaklamadığı yönündeki kararını gerekçe gösterirler. Bu uygulamanın eleştirmenleri, bu analojinin "çoğu insanın, örneğin kullanılmış bir kahve kupasını yok etmeyerek polise genetik kimliklerini teslim etme riski taşıdıklarını fark etmediklerini" göz ardı ettiğini vurgulamaktadır. Dahası, bunu fark etseler bile, sokakta DNA bırakmaktan kaçınmanın bir yolu yoktur."[77]
Amerika Birleşik Devletleri Yüksek Mahkemesi, Maryland - King (2013) davasında, ciddi suçlardan tutuklanan mahkumların DNA örneklemesinin anayasaya uygun olduğuna karar verdi.[78][79][80]
Birleşik Krallık'ta, 2004 İnsan Dokusu Yasası, özel kişilerin DNA analizi için gizlice biyolojik örnekler (saç, tırnak vb.) toplamasını yasaklamakta, ancak tıbbi ve ceza soruşturmalarını bu yasaklamadan muaf tutmaktadır.[81]
İngiltere ve Galler
[düzenle]
DNA örneklerini karşılaştıran bir uzmandan alınan kanıtlar, örneklerin kaynakları ve DNA profillerini elde etme prosedürleri hakkındaki kanıtlarla birlikte verilmelidir.[82] Yargıç, jürinin DNA eşleşmelerinin ve eşleşmemelerinin profillerdeki önemini anladığından emin olmalıdır. Yargıç ayrıca, jürinin eşleşme olasılığını (rastgele seçilen bir kişinin olay yerindeki örnekle eşleşen bir DNA profiline sahip olma olasılığı) eşleşen DNA'ya sahip bir kişinin suçu işleme olasılığı ile karıştırmadığından emin olmalıdır. 1996 R v. Doheny[83]
Jüriler, "kafa karışıklığından, yanlış anlamadan ve yanlış yargılamadan" kaçınmak için Bayes teoremi gibi matematiksel formüller kullanmak yerine kendi sağduyularını kullanarak çelişkili ve destekleyici kanıtları tartmalıdır.[84]
Kısmi veya eksik DNA profillerinin kanıtlarının sunulması ve değerlendirilmesi
[düzenle]
R v Bates'te,[85] Moore-Bick LJ şunları söyledi:
Kısmi profil DNA kanıtının, jüriye doğasında var olan sınırlamaları hakkında bilgi verilmesi ve bunu değerlendirmeleri için yeterli bir açıklama yapılması koşuluyla kabul edilebilir olmasına hiçbir neden göremiyoruz. Test edilen tüm örneklerle ilgili eşleşme olasılığının o kadar büyük olduğu vakalar olabilir ki, yargıç bunun ispat değerinin asgari düzeyde olacağını düşünebilir ve takdir yetkisini kullanarak kanıtı reddetmeye karar verebilir, ancak bu yeni bir ilke sorunu yaratmaz ve vaka bazında karar verilmesi için bırakılabilir. Ancak, tüm kısmi profil kanıtlarında, "kayıp" bir alelin sanığı tamamen masum çıkarabileceği olasılığının var olması, bu tür kanıtları reddetmek için yeterli bir neden oluşturmaz. Birçoğunda, sanığa yardımcı olacak ve hatta onu tamamen masum çıkaracak kanıtların var olma olasılığı (en azından teoride) vardır, ancak bu, mevcut ve başka şekilde kabul edilebilir ilgili kanıtları hariç tutmak için yeterli bir neden oluşturmaz, ancak jüriye bu kanıtı düzgün bir şekilde değerlendirmeleri için yeterli bilgi verilmesini sağlamayı önemli kılar.[86]
Amerika Birleşik Devletleri'nde DNA testi
[düzenle]
Amerika Birleşik Devletleri'nin tüm 50 eyaletinde DNA profilleme konusunda eyalet yasaları bulunmaktadır.[87] Her eyaletteki veritabanı yasaları hakkındaki ayrıntılı bilgi Ulusal Eyalet Yasama Meclisleri Konferansı web sitesinde bulunabilir.[88]
Yapay DNA'nın geliştirilmesi
[düzenle]
Ağustos 2009'da İsrail'deki bilim insanları, DNA'nın kolluk kuvvetleri tarafından nihai kimlik belirleme yöntemi olarak kullanılması konusunda ciddi şüpheler uyandırdı. Forensic Science International: Genetics dergisinde yayınlanan bir makalede, İsrailli araştırmacılar, adli kanıtları tahrif ederek bir laboratuvarda DNA üretmenin mümkün olduğunu gösterdi. Araştırmacılar, başlangıçta kan ve tükürüğün sözde donöründen başka bir kişiye ait DNA içeren tükürük ve kan örnekleri ürettiler.[89]
Araştırmacılar ayrıca, bir DNA veritabanı kullanılarak bir profilden bilgi alınıp buna uyacak şekilde DNA üretmenin mümkün olduğunu ve bunun kişinin gerçek DNA'sına erişim olmadan da yapılabileceğini gösterdi. Prosedür için gereken sentetik DNA oligoları moleküler laboratuvarlarda yaygındır.[89]
New York Times, baş yazar Daniel Frumkin'in, "Bir suç mahallini kolayca tasarlayabilirsiniz... herhangi bir biyoloji lisans öğrencisi bunu yapabilir" dediğini aktardı.[89] Frumkin, gerçek DNA örneklerini sahte olanlardan ayırt edebilen bir test geliştirdi. Testi, özellikle DNA metilasyonu olmak üzere epigenetik modifikasyonları tespit ediyor.[90] Her insan genomundaki DNA'nın yüzde yetmişi metillenmiştir, bu da bir CpG dinükleotit bağlamı içinde metil grubu modifikasyonları içerdiği anlamına gelir. Promotör bölgesindeki metilasyon, gen susturulması ile ilişkilidir. Sentetik DNA bu epigenetik modifikasyondan yoksundur, bu da testin üretilmiş DNA'yı gerçek DNA'dan ayırmasına olanak tanır.[89]
Kaç polis departmanının bu testi kullandığı bilinmemektedir. Hiçbir polis laboratuvarı, DNA sonuçlarını doğrulamak için yeni testi kullandığını kamuya açıklamadı.[91]
Tokyo Üniversitesi'ndeki araştırmacılar, ilk kez hücre içermeyen malzemeler kullanarak yapay bir DNA çoğaltma şemasını yeniden oluşturulmuş bir gen ifadesi sistemi ve mikro-bölmelendirme ile birleştirdi. Seri seyreltmenin birden çok döngüsü, mikro ölçekli yağ içindeki su damlacıklarında bulunan bir sistemde gerçekleştirildi.[92]
Kasıtlı olarak DNA değiştirme olasılıkları
Genel olarak, kendi kendini kodlayan proteinleri kullanarak çoğalmaya devam eden ve dizisini kendi başına iyileştiren bu çalışmanın yapay genomik DNA'sı, daha karmaşık yapay hücreler yapmak için iyi bir başlangıç noktasıdır. Yapay genomik DNA'ya transkripsiyon ve translasyon için gereken genleri ekleyerek, gelecekte amino asitler ve nükleotidler gibi küçük moleküllerle beslendiğinde kendi kendine büyüyebilen yapay hücreler yapmak mümkün olabilir. İlaç ve gıda gibi kullanışlı şeyler yapmak için canlı organizmalar kullanmak, bu yapay hücrelerde daha kararlı ve kontrolü daha kolay olacaktır.[92]
7 Temmuz 2008'de Amerikan kimya derneği, Japon kimyagerlerin neredeyse tamamen sentetik bileşenlerden oluşan dünyanın ilk DNA molekülünü yarattığını bildirdi.
Gen düzenlemesi için nanoparçacık tabanlı yapay transkripsiyon faktörü:
Nano Script, TF'lerin yapısını ve işlevini taklit etmesi amaçlanan nanoparçacık tabanlı bir yapay transkripsiyon faktörüdür. Altın nanoparçacıklar üzerinde, çeşitli TF alanlarını taklit eden fonksiyonel peptidler ve sentetik transkripsiyon faktörleri olarak adlandırılan küçük moleküller yapıştırılarak Nano Script oluşturuldu. Nano Script'in nükleusa lokalize olduğunu ve bir raporlayıcı plazmidi 15 kattan fazla bir miktar halinde transkribe etmeye başladığını gösteriyoruz. Ayrıca, Nano Script, hedeflenen genleri endojen DNA üzerine nonviral bir şekilde başarılı bir şekilde transkribe edebilir.[93]
DNA çubuğu yüzeyine dikkatlice sabitlenen üç farklı florofor - kırmızı, yeşil ve mavi - uzamsal bilgi sağlamak ve bir nanoskalalı barkod oluşturmak için kullanıldı. Epifloresans ve toplam içe yansıma floresan mikroskobu, floroforlar arasındaki uzamsal bilgiyi güvenilir bir şekilde çözdü. Üç floroforu DNA çubuğu üzerinde hareket ettirerek, bu nanoskalalı barkod 216 floresan deseni oluşturdu.[94]
Vakalar
[düzenle]
1986'da, DNA profillemenin ilk geliştirildiği Leicester şehri yakınlarında bir gencin tecavüzü ve cinayetini itiraf etmesine rağmen Richard Buckland aklanmıştır. Bu, DNA parmak izinin bir ceza soruşturmasında ilk kullanımı ve bir şüphelinin masumiyetini kanıtlayan ilk olaydı.[95] Sonraki yıl Colin Pitchfork, Buckland'ı aklayan tekniklerin aynısı kullanılarak aynı cinayetin ve bir başkasının faili olarak tanımlandı.[96]
1987'de, genetik parmak izi, Amerika Birleşik Devletleri'nde akıl engelli 14 yaşındaki bir kızla yasa dışı cinsel ilişki kurmakla suçlanan bir adamın davasında ilk kez kullanıldı ve kız doğum yaptı.[97]
1987'de, Florida tecavüzcüsü Tommie Lee Andrews, bir tecavüz nedeniyle DNA kanıtı sonucu Amerika Birleşik Devletleri'nde mahkum edilen ilk kişi oldu; 6 Kasım 1987'de mahkum edildi ve 22 yıl hapis cezasına çarptırıldı.[98][99]
1990'da, Brno'da genç bir öğrencinin vahşice öldürülmesi, DNA kanıtıyla çözülen Çekoslovakya'daki ilk ceza davasıydı ve katil 23 yıl hapis cezasına çarptırıldı.[100][101]
1992'de, bir palo verde ağacının DNA'sı, Mark Alan Bogan'ı cinayetten mahkum etmek için kullanıldı. Olay mahallindeki bir ağacın tohum kapsüllerindeki DNA'nın, Bogan'ın kamyonetinde bulunan tohum kapsülleriyle eşleştiği bulundu. Bu, bir ceza davasında bitki DNA'sının kabul edildiği ilk örnektir.[102][103][104]
1994'te, Anna Anderson'ın Rusya Büyük Düşesi Anastasia Nikolaevna olduğu iddiası, ölümünden sonra Charlottesville'daki bir hastanede tıbbi bir prosedür sonrası saklanan doku örnekleri kullanılarak test edildi. Doku DNA parmak izi kullanılarak test edildi ve Romanovlarla hiçbir ilişkisi olmadığını gösterdi.[105]
1994'te, Earl Washington, Jr., idam cezasının infazına bir hafta kala DNA kanıtlarına dayanarak müebbet hapse çevrildi. Daha gelişmiş testlere dayanarak 2000 yılında tam af aldı.[106]
1999'da, Swindon, İngiltere'den engelli bir adam olan Raymond Easton, yerinde DNA'nın kendisine uyduğu gerekçesiyle bir hırsızlık bağlantısıyla tutuklandı ve yedi saat gözaltında tutuldu. Daha doğru bir test açık farklılıklar gösterdiğinde serbest bırakıldı. DNA'sı daha önce bir aile olayı sonrası dosyada tutuluyordu.[107]
2000 yılında Frank Lee Smith, Florida, ABD'de 14 yılını ölüm sırasındaki hücrede geçirdikten sonra bir kızın cinayetinden DNA profilleme ile masum olduğunu kanıtladı. Ancak masumiyeti kanıtlanmadan kısa bir süre önce kanserden ölmüştü.[108] Bu ışığında Florida eyaleti valisi, gelecekteki herhangi bir ölüm sırası mahkumunun DNA testi yapılması gerektiğine karar verdi.[106]
Mayıs 2000'de Gordon Graham, Kuzey İrlanda'nın Lisburn kentinde Paul Gault'u evinde öldürdü. Graham, cinayetin bir hırsızlık sonrası gerçekleştiği izlenimi vermek için kurulan ayrıntılı bir planın parçası olarak evde bırakılan bir spor çantasında bulunan DNA'sının eşleşmesiyle cinayetten mahkum edildi. Graham, cinayet sırasında kurbanın karısıyla bir ilişkisi vardı. Bu, Kuzey İrlanda'da Düşük Kopya Sayılı DNA'nın ilk kez kullanılmasıydı.[109]
2001'de Wayne Butler, Celia Douty'nin cinayetinden mahkum edildi. Bu, DNA profilleme kullanılarak çözülen Avustralya'daki ilk cinayetti.[110][111]
2002'de, 1962'de "A6 cinayeti" nedeniyle asılan James Hanratty'nin cesedi mezarından çıkarıldı ve cesetten ve ailesinin üyelerinden alınan DNA örnekleri analiz edildi. Sonuçlar, Temyiz Mahkemesi yargıçlarını, kampanyacılar tarafından şiddetle tartışılan Hanratty'nin suçluluğunun "şüphesiz" kanıtlandığına ikna etti.[112] Paul Foot ve bazı diğer kampanyacılar Hanratty'nin masumiyetine inanmaya devam ettiler ve DNA kanıtının kontamine olabileceğini savundular, 40 yılı aşkın bir süredir bir polis laboratuvarında "modern delil standartlarını karşılamayan koşullarda" tutulan giysi parçalarından alınan küçük DNA örneklerinin, herhangi bir genetik profil üretmek için çok yeni çoğaltma tekniklerine tabi tutulması gerektiğini belirttiler.[113] Ancak, test edilen kanıtlarda Hanratty'ninkinden başka DNA bulunmadı, bu da kanıtın gerçekten kontamine olduğunu varsayılana aykırıydı.[114]
Ağustos 2002'de Annalisa Vicentini, Toskana'da vurularak öldürüldü. Barmen Peter Hamkin, 23, Mart 2003'te Merseyside'da, kendisinin İtalya'ya götürülüp götürülmeyeceğini belirlemek için Londra'daki Bow Street Sulh Mahkemesi'nde görülen bir iade emri üzerine tutuklandı. DNA onu vurduğunu "kanıtladı", ancak diğer kanıtlarla aklanmıştı.[115]
2003'te Galli Jeffrey Gafoor, 1988'deki Lynette White cinayetinden mahkum edildi; 12 yıl önce toplanan olay yeri kanıtları, yeğeniyle bir eşleşme sonucu STR teknikleri kullanılarak yeniden incelenmişti.[116]
Haziran 2003'te, yeni DNA kanıtları nedeniyle Dennis Halstead, John Kogut ve John Restivo, 1986'daki cinayet mahkumiyetlerinin yeniden yargılanmasını kazandı, mahkumiyetleri kaldırıldı ve serbest bırakıldılar.[117]
2004'te DNA testi, 1912'de bir balık tutma gezisi sırasında ortadan kaybolan dört yaşındaki bir çocuk olan Bobby Dunbar'ın gizemli kayboluşuna yeni bir ışık tuttu. Sekiz ay sonra William Cantwell Walters'ın gözetiminde canlı bulunduğu iddia edildi, ancak başka bir kadın da çocuğun kendisine emanet ettiği oğlu Bruce Anderson olduğunu iddia etti. Mahkemeler onun iddiasını kabul etmedi ve Walters'ı kaçırmaktan mahkum etti. Çocuk hayatının geri kalanında Bobby Dunbar olarak büyüdü ve tanındı. Ancak, Dunbar'ın oğlu ve yeğeninden alınan DNA testleri, ikisinin akraba olmadığını ortaya çıkardı, böylece 1912'de bulunan çocuğun, gerçek kaderi bilinmeyen Bobby Dunbar olmadığı kanıtlandı.[118]
2005'te Gary Leiterman, Michigan Üniversitesi hukuk öğrencisi Jane Mixer'ın 1969 cinayetinden, Mixer'ın külotunda bulunan DNA'nın Leiterman'a eşleşmesiyle mahkum edildi. Mixer'ın elindeki bir damla kandaki DNA, 1969'da sadece dört yaşında olan ve başka hiçbir yolla vakayla bağlantısı kurulamayan John Ruelas ile eşleşti. Leiterman'ın savunması, kan lekesinin Ruelas ile açıklanamayan eşleşmesinin çapraz bulaşmaya işaret ettiğini ve laboratuvarın Leiterman'ın kimliğinin güvenilirliği hakkında şüpheler uyandırdığını başarısızlıkla savundu.[119][120]
Kasım 2008'de Anthony Curcio, tarihin en ayrıntılı planlanmış zırhlı araç soygunlarından birini yönetmekle tutuklandı. DNA kanıtı Curcio'yu suçla ilişkilendirdi.[121]
Mart 2009'da Sean Hodgson - 1979'da Southampton'da arabasında Teresa De Simone, 22'yi öldürmekten mahkum edildi - olay yerindeki DNA'nın kendisine ait olmadığını kanıtlayan testlerden sonra serbest bırakıldı. Daha sonra David Lace'in mezarından çıkarılan DNA ile eşleşti. Lace daha önce suçu kabul etmişti ancak dedektifler tarafından inanılmamıştı. Aynı zamanda işlenen diğer suçlardan dolayı hapiste yattı ve ardından 1988'de intihar etti.[122]
2012'de, onlarca yıl önce bebeklerin değiştirildiği bir vaka kazara keşfedildi. Başka amaçlarla DNA testi yaptırdıktan sonra Alice Collins Plebuch, ailesi ağırlıklı olarak İrlandalı olduğuna inanmasına rağmen, soyunun önemli bir Aşkenaz Yahudisi bileşeni içerdiğini gösteren bir analiz aldı. Plebuch'un genomunun profillenmesi, Aşkenaz, Orta Doğu ve Doğu Avrupa popülasyonlarıyla ilişkili belirgin ve beklenmedik bileşenler içerdiğini düşündürdü. Bu, Plebuch'un kapsamlı bir araştırma yapmasına yol açtı ve ardından babasının doğumdan kısa bir süre sonra başka bir bebekle (muhtemelen kazara) değiştirildiği sonucuna vardı. Plebuch ayrıca babasının biyolojik atalarını da belirleyebildi.[123][124]
2015'te, X ve Anor - Z (Çocuklar) ve Anor davasında, İngiltere ve Galler Temyiz Mahkemesi, polisin bir ceza soruşturması sırasında yaptığı bir DNA profilinin babalık testi için kullanılmasının yasal olmadığına karar verdi.
2016'da bebekken terk edilen Anthea Ring, bir DNA örneği ve DNA eşleştirme veritabanı kullanarak Kontluk Mayo, İrlanda'daki merhum annesinin kimliğini ve köklerini bulabildi. Yakından yürütülen soybilim araştırmasıyla ortaya çıkarılan şüpheli babasından kalan eski pullar ve zarflar üzerindeki tükürükten DNA yakalamak için yakın zamanda geliştirilmiş bir adli test kullanıldı. İlk üç numunedeki DNA kullanılamayacak kadar bozulmuştu. Ancak, dördüncüsünde, yeterli miktarda DNA bulundu. Birleşik Krallık mahkemelerinde kabul edilebilir bir doğruluk derecesine sahip olan test, Patrick Coyne adında bir adamın biyolojik babası olduğunu kanıtladı.[125][126]
2018'de Buckskin kızı (1981'de Ohio'da bulunan bir ceset), DNA soybilim teknikleri kullanılarak Arkansas'tan Marcia King olarak tanımlandı[127]
2018'de Joseph James DeAngelo, DNA ve soybilim tekniklerinin yardımıyla Golden State Katili için ana şüpheli olarak tutuklandı.[128]
2018'de William Earl Talbott II, 1987'deki Jay Cook ve Tanya Van Cuylenborg cinayetlerinin şüphelisi olarak, genetik soybilim testinin yardımıyla tutuklandı. Bu vakada polise yardım eden aynı genetik soybilimci, 2018'de 18 başka tutuklamaya da yardım etti.[129]
2018'de, FBI, Next Generation Identification System'in geliştirilmiş biyometrik yeteneklerinin yardımıyla, şüpheli Timothy David Nelson'ın parmak izini eşleştirerek onu iddia edilen cinsel saldırıdan 20 yıl sonra tutukladı.[130]
İngiliz unvanlarının veraset haklarını kanıtlamak için DNA kanıtı
[düzenle]
DNA testi, İngiliz unvanlarının veraset hakkını belirlemek için kullanılmıştır.[131]
Vakalar:
Baron Moynihan
Pringle baronları
Ayrıca bakınız
[düzenle]
Referanslar
[düzenle]
Daha fazla okuma
[düzenle]