Yaklaşık 100 yıl önce Efes'teki Sekizgen mezarın lahitinde keşfedilen iskelet, Kraliçe Kleopatra VII'nin üvey kız kardeşi olan Mısır Kraliçesi IV. Arsinoe'ye ait değil
Efesos antik şehrindeki arkeolojik kazıların tarihi 100 yıldan fazla bir geçmişe sahiptir. Bu yer, Anadolu'daki en önemli antik yerleşim yerlerinden biridir. Avusturya Arkeoloji Enstitüsü 1895'ten beri burada faaliyet göstermektedir. 1904 yılında Rudolf Heberdey, Josef Keil ve Wilhelm Wilberg, antik Efes'in şehir merkezindeki alt "Kuretenstraße" boyunca Sekizgen ve diğer yapılar ortaya çıkarmıştır. Mimari tarzı ve önemli konumu nedeniyle, Sekizgen'in keşfedildiği anda hemen bir heroon olarak kabul edilmiştir. Max Theuer ve Josef Keil, Sekizgen'in mezar odasını daha sonraki bir kazıda 1929'da açıp mermer bir lahit keşfettiler. Ölen kişinin kimliği hakkında bir ipucu veren hiçbir mezar eşyası veya yazı bulunmamıştır. Lahit neredeyse tamamen suyla doluydu ancak dibinde tek bir iskelet ortaya çıktı. Bilinmeyen bir nedenle, Keil sadece kafatasını mezardan çıkardı ve ardından mezarı tekrar kapattı. Post-kranyal kalıntılar, muhtemelen çene kemiğiyle birlikte mezar odasında kaldı. Keil'in kafatasını Greifswald'a (Almanya) kesin olarak geri getirdiğini biliyoruz, burada antik tarih profesörüydü. İnceledikten sonra, 20 yaşında ve muhtemelen kadın olduğu düşünülen kişinin "muhtemelen çok saygın bir kişilik" olduğuna dair hemen bir tahminde bulundu. Keil herhangi bir veri sağlamadı, sadece kendi ve meslektaşının görüşlerini verdi, ancak daha fazla spekülasyon için bir yol hazırladı.
Sekizgen'in mimari tarzının daha sonra, İskenderiye Feneri'ne benzediği kabul edildi, ancak Feneri ile özdeşleştirme karşıt görüşler de mevcuttur. Tahmini inşa tarihi, MÖ son on yılların yakınında olabilir. Sekizgen'in Efes kentsel alanındaki olağanüstü önemine, Sekizgen'e gömülen kişinin 20 yaşında bir kadın olduğuna dair Keil'in antropolojik değerlendirmesine ve muhtemel Mısır etkilerine işaret eden yapısal şekline dayanarak Hilke Thür, gömülü kişinin MÖ 80-51 yılları arasında Ptolemaik Krallığı'nı yöneten Kral Ptolemy XII'nin beş çocuğundan biri olan Arsinoë IV olabileceği hipotezini ortaya attı. Arsinoë IV, sadece Kleopatra VII'nin (yarı) kız kardeşi olarak tarihsel olarak önemli değil, aynı zamanda MÖ 48-47 yıllarında Kleopatra VII'ye karşı İskenderiye kuşatmasını yöneten kişidir. Kleopatra VII, Roma imparatoru Julius Caesar ile ittifak kurmuştu. Arsinoë IV bu savaşı kaybetti, yakalandı ve MÖ 46'da Roma'da zincirlerle sergilendi. Korkmuş ve ağladığı, ancak görünüşünde dikkate değer bir özellik olmadığı anlatıldı. Daha sonra Efes'teki Artemis Tapınağı'nın sığınağında korunmuştur. Birkaç yıl sonra Kleopatra VII, Marcus Antonius ile ittifak kurdu ve söylentilere göre MÖ 41'de Arsinoë IV'ün idam emrini verdi.
Josef Keil, Viyana Üniversitesi'nde (1936-1950) Yunanca ve antik tarih profesörü olurken, Efes Sekizgen'inden gelen kafatası, Viyana Üniversitesi'ndeki departmanıyla birlikte Keil'le taşındı. 1953'te Viyana Antropoloji Enstitüsü'nü 1955'e kadar yöneten Josef Weninger, kafatasının morfولوجisi üzerine bir makale yayınladı. Klasik kraniometrik ölçümlere ek olarak, Weninger ölüm anındaki yaşını 16-17 yıl ve cinsiyetini kadın olarak belirledi. Weninger, kafatasının gelişiminin bozulmamış olduğunu ve yalnızca hafif diş aşınmasından başka bir anormallik belirtmediğini belirtti. Düşük yüksekliğe sahip ve neredeyse kayıp köpek fosaları olan, incisura malaris'i olmayan ve güçlü bir şekilde eğik alt çene eklemi ve küçülmüş üst çene gövdesi olan bir kafatası. Ayrıca, iskeletin daha yüksek aristokrasiye işaret eden "rafinasyon tipinde bir insan" a ait olabileceğine dair spekülasyonlarda bulundu. Bu açıklama, iskeletin Arsinoë IV'e ait olduğu hipotezini daha da güçlendirdi. Kafatası, Weninger'in 1953 yayınındaki resimlerle oksipital kemiğinin üzerine işlenmiş "Efes Heroengrab" etiketi ile unutuldu ve Aralık 2022'ye kadar göz ardı edildi.
Post-kranyal kalıntılarının kaderi daha az kesindir. 1982'de Hermann Vetters yönetiminde Sekizgen yeniden ziyaret edildi ve mezar odası yeniden açıldı. Post-kranyum, odanın kuzey duvarındaki iki nişte ve Dromos'un (bir mezara giden giriş geçidi) iç ucundaki kirişin üzerindeki birkaç kemikte bulundu. Bu, 1929'da J. Keil'in suyla dolu lahitte gördüğü post-kranyal iskelet ise, bu soruya ilişkin hiçbir rapor bulunmadığı için ne zaman ve nasıl lahitten çıkarıldığı hakkında sadece spekülasyon yapabiliyoruz. 1993'te Hilke Thür, mezarı yeniden ziyaret edip bu post-kranyal kalıntıları inceledi. Son olarak, 2007'de Dromos'ta daha fazla post-kranyal parça, aralarında bir kaburga parçası da bulundu. Sürekli ve kesin bir tarihin olmaması nedeniyle, zıt kanıtlanıncaya kadar post-kranyal kalıntılar ve kafatası ayrı bireyler olarak ele alınmak zorundaydı. Kanz ve meslektaşları, 2009'da Sekizgen'den post-kranyumun morfolojik ve patolojik analizleri hakkında bir konferans posteri yayınladılar, doğrulanmamış Arsinoë IV kafatasının bile yumuşak doku rekonstrüksiyonunu içermesine rağmen, kafatası o zaman ne fiziksel ne de sanal olarak erişilebilir değildi, sadece Weninger'in 1953'te yayınladığı birkaç resim dışında. Kanz ve meslektaşları, ölüm anındaki yaşını 15-17 yıl, vücut yüksekliğini 154 cm (± 3 cm), iskeletin de kadın olduğunu tahmin ettiler. Bu yazarlara göre, iskelet zayıf ve kırılgan görünüyordu ve aşırı iş veya hastalık belirtisi göstermiyordu. Elde ettikleri radyokarbon tarihi, MÖ 210-20 yılları arasında (yüzde 94 olasılık) bir tarih aralığı vermiş ve DNA analizleri kesin sonuçlar ortaya koymamıştır.
Kafatasının morfolojisi
Sekizgen kafatası (Şekil 1) iyi korunmuştur ve yalnızca sol ve sağ temporal bölgelerde iki büyük ölüm sonrası defekt gösterir ve üst sol birinci molar (M1) ile üçüncü molar (M3) arasında ve üst sağ premolar (P3) ile M3 arasında dış alveolar kenarları eksiktir. Sadece üst sol P3 ve üst sol M1 orijinalindedir; Weninger'in (üst sağ M1 ve M2, üst sol M2, alt sağ M1) tarif ettiği diğer dişler eksiktir ve Viyana Üniversitesi Evrimsel Antropoloji Bölümü koleksiyonunda bulunamamıştır. Alt çene eksiktir ve ne Keil ne de Weninger tarafından hiçbir zaman bahsedilmemiştir, ancak Weninger alt sağ bir moları listelemiştir, bu da yanlış sınıflandırılma sorusunu gündeme getirir. Kafatası kırılgan, kafatası kemikleri ince ve kas işaretleri zayıftır; bunlar Weninger'in önerdiği kadın durumu veya ergen bir erkek durumu ile uyumludur. Kafatası braşikranik (kısa ve geniş) ve uzunluğa (kamekranik) ve genişliğe (hiper-tapeinokranik) göre düşüktür. Seçilen geleneksel kraniometrik ölçümler, Weninger'in değerleriyle karşılaştırma amacıyla Tablo 1'de verilmiştir. Ancak Weninger kafatasını tam tersine, yani doloşikranik olarak tanımlamıştır. Sanal endocast, modern insanlarda tipik aralıkta olan 1428,75 cm3'lük bir endo kranial kapasite gösterir ve sağ oksipital ve zayıf sol frontal petalya, insanlar arasındaki baskın desenin aksinedir (Ek Bilgi Şekil S6).
Gözlemlenen güçlü asimetri ve deformasyon işaretleri, daha önce tarif edilmemişti. Bazal görünümde, tüm kafatası bir fleksiyon göstermektedir. Oksepit sol tarafa kaymış ve foramen magnum eğimli yönlendirilmiştir. Her iki oksipital kondil de, bireyin genç yaşına rağmen, eklem yüzeylerinin medial ve anterior kenarlarında ciddi ön ölüm defektleri gösterir (Ek Bilgi Şekil S7). Derin alt çene fosaları sıradışı değildir, ancak kafatasının orta sagittal düzlemine (MSP) aşırı bir açıyla eğilmiştir (Şekil 1f ve 2). Sol ve sağ taraflar ayrıca yaklaşık 3 derece farklılık gösterir (aksiyel kondiler açısı sol 48,3°, sağ 51,5°). Tayvan'daki 64 simetrik ve asimetrik hastadan oluşan son bir örnekte, aksiyel kondiler açısı simetrik hastalarda 74,97° (± 6,43° SD), asimetrik hastalarda ise 74,04° (± 8,71° SD) olarak bulunmuştur. Bu durum Sekizgen kafatasının simetrik grubun 3 SD'si dışında, asimetrik grubun 3 SD'si içinde olduğunu gösterir. Brezilya'dan 82 bireyin çalışmasında, alt çene kondiler işleminin ortalama eğimi sağda 65,03° (± 9,05° SD) ve solda 63,44° (± 7,90° SD) olarak bulunmuştur. Sekizgen kafatasındaki sağ-sol farkı, Tayvan örneğindeki farkın yarısıdır ve açıdaki fark, Tayvan örneğine göre daha küçüktür, bu da Sekizgen kafatasının sağda -1,5 SD, solda -1,9 SD içinde olduğunu gösterir. Türkiye'den yapılan başka bir çalışmada, 31 sağlıklı kontrol bireyin yatay kondiler açısı 25,68° (± 9,31° SD), karşılık gelen aksiyel kondiler açısı 64,32° (± 9,31° SD) olarak bulunmuş, bu da 16 ile uyumludur. İç kulağın (genetik örneklem almadan önce alınan) yüksek çözünürlüklü µCT taramaları (80 µm), korunmuş işitsel kemikçiklerin (sadece sol çekiç ve sağ üzengi) ortalama boyut ve şeklini ortaya koymaktadır. Diğer kemikçiklerin son iki bin yılda kaybolup kaybolmadığı veya yokluklarının kemikçik zinciri deformasyonlarıyla ilişkili olup olmadığı açık bir sorudur.
Sağ oksipitomastoide sütür iyi görünür ve diğer açık kafatası sütürleri ile aynı durumdadır. Aksine, sol oksipitomastoid sütür tamamen yok olmuştur ve yolundan hiçbir iz bırakmamıştır (Şekil 1f ve 2). Bu sütür genellikle yaşlılıkta (65+ yıl) kaynaşır. Bu kraniosinoz, büyüme sırasında oluşan kafatası deformasyonunun kısmen açıklanabilir. Sanal endocast ayrıca, sağ tarafa göre sol lamboidal sütürün daha erken kapanma belirtileri ve sağda soldan daha büyük transversal ve sigmoid sinüs göstermektedir (Ek Bilgi Şekil S6). Sfenobaziler sinkondroz geniş açık (~3-4 mm, Şekil 3). Sağ göz yuvası, soldan 1,2 mm daha alçaktadır (antropolojik bir norm oryantasyonu kullanılarak), burun bölümü üst kısmında ve Crista Galli'nde önemli ölçüde sola kaymaktadır.
Bu kafatasının en çarpıcı özelliği, yine de gelişmemiş ve anormal şekilde eğimli üst çenedir (Şekil 1a, b, e). Weninger, "zayıf üst çene, azalmış kemik dokusu" hakkında ancak kafatası tabanına göre damak ve yüzün çok alışılmadık bir eğimini gösteren gerilemiş üst çene pozisyonunun ayrıntılarına girmemişti (Şekil 1b ve e, Ek Bilgi Şekil S8). 137,9°'lük bazal fleksiyon, modern insanlarda normal aralıkta (127,7° - 153,7°), ancak foramen magnuma göre damağın eğimi 145,9°'lük bir değerle, coğrafi olarak çeşitli bir örneklemdeki modern Homo sapiens'te gözlemlenen varyasyonun dışındadır (150,2° - 178,0°) (Şekil 4A, Ek Bilgi Tablosu S3).
Üst çenenin anormal konumu daha önceki çalışmalarda tanınmamıştı, ancak standart görsel incelemelerde görülebilir. 23 klasik kafatası belirteci kullanılarak, son teknoloji Geometrik Morfometrik analiz gerçekleştirdik. Şekil 4B, Sekizgen kafatasının olağanüstü morfolojisini göstermektedir, çünkü beş kıtadan örneklenen 42 kafatasından hiçbiri belirli şekline yakın değildir. Ayrıca, orijinal ve karşılıklı aynalı örnekler arasındaki şekil uzayında Procrustes uzaklıklarını karşılaştırarak bireysel asimetri derecesini belirledik. Sekizgen kafatası örneklemdeki en asimetrik olanıdır ve 0,065'lik aşırı bir Procrustes uzaklığı vardır (ortalama = 0,032, SD = 0,010), bu da ortalamadan 3 SD dışındadır.
Dişler
Oklüzal görünümde, M1 herhangi bir parlak nokta olmadan aşınmamış bir yüzey gösterir. Bu nedenle, bu dişin antagonist dişleriyle herhangi bir statik, destekleyici veya dinamik temas halinde olduğu kanıtı yoktur (Şekil 5). Bu, üst çenede ilk kalıcı diş olarak filizlenen M1'in fonksiyonel kullanımda olmadığını gösterir. Özellikle distal olan oklüzal çatlaklar yabancı bir madde ile kaplıdır. Yanak yüzeyi diş taşı gösterir. Distobukal ve mesiolingual sement-enamel kavşağında hafif hipoplazi belirtileri önerilmektedir. µCT görüntüleri, emaye ve dentin maddesinde çok sayıda çatlak ortaya koymaktadır. Emayenin hemen altındaki bazı koyu bantlar (Ek Bilgi Şekil S9b, S18a, S18b), yaygın çatlaklardan daha geniş ve daha dağınık olmalarıyla farklılık göstermektedir. Bunlar, vitamin D eksikliğine işaret edebilecek interglobüler dentin (IGD) gösterebilir. İlk çürüme, P4 ile eski temas alanında ve mesiobukal kök yüzeyinde görülmektedir. P3, dikkat çekici şekilde dilsel olarak eğimlidir ve mesiodistal çatlakta siyah bir renk değişikliği göstermektedir. Sonraki analizler, çürük demineralizasyonu onaylamadı. Kahverengi diş taşı, emaye üzerinde ve bukkal ve palatal köklerin arasında mesialde mevcuttur. M1'in aksine, P3 özellikle yanak çıkıntılı tepesinde bir çukur derinleşmesi, dentin çürüğü ve mesial, distal, bukkal ve dilsel yönde başlayan aşınmadan kaynaklanan dört çatlak içeren belirgin aşınma belirtileri göstermektedir. Köke, alveolar kemik seviyesinin derinliklerine kadar devam eden kırıklar, dişin tüm yanak tarafında bulunabilir. P3'ün kararsız durumu, bukkal alveolar duvarında kemik emilimine neden olmuştur. Bu nedenle, bu çatlakların ön ölüm sonucu meydana geldiği sonucuna vardık (dişler hakkında daha detaylı bir açıklama için Ek Bilgi'ye bakınız).
Genel olarak, hafif çürüme etkisi, minimal gelişimsel bozukluk belirtileri (hipoplazi) ve kök ve sinir kanalları ile ilgili herhangi bir özellik bulunmadığını bulduk. P3 ve M1 diş taçlarının 3B şekil ve boyutunu coğrafi olarak çeşitli bir örneklemle karşılaştırdığımızda, ne şekil ne de boyut açısından herhangi bir özellik tespit edilmemiştir (Ek Bilgi Şekil S1, S2, S3, S4 ve Tablo S1). Fonksiyonel açıdan, M1'deki aşınmanın tamamen olmaması, gözlemlenen aşınma ve kırılmalar ve bunun sonucunda ortaya çıkan P3'ün etkilenmesi dikkat çekicidir. Aşırı aşınma, kırılma ve ardından ortaya çıkan alveolar kemik emilimi, fonksiyonel aşırı yüklenme ve uygun olmayan oklüzal ilişkilerden kaynaklanabilir. 11 ila 14 yaş arasında tahmin edilen yaş aralığı göz önüne alındığında, M1'in beş ila sekiz yıl boyunca fonksiyonda olması gerekirken, P3 genellikle dört yıl sonra filizlenir; bu nedenle M1'den daha önemli bir aşınma ve hasar göstermemesi gerekir. Bu göz önüne alındığında, M1'in antagonistleriyle fonksiyonel bir kapanışa girmemiş olmasının nedeni aşındırıcı olmayan bir diyetten ziyade çiğneme bozukluğu olduğu düşünülebilir. Üst çene kemerinin dikey yönelimi ve alt çene fossalarının eğimi, dikey bir üst çene büyümesi ve potansiyel olarak geriye doğru küçük bir alt çene göstermektedir.
Ölüm anındaki yaş
P3'ün kök büyümesi tamamlanmıştır, ancak apikal mineralizasyon hala sona ermemiştir (Ek Bilgi Şekil S9a). Modern popülasyonlardan yayınlanan standartlara göre, bu, geniş bir Japon ortopanoramik grafi örneklerinde erkeklerin ortalama (genetik sonuçlara bakın) 11,4 ± 1,0 yıl SD ve medyanının <13 yıl; büyük bir Türk panoramik radyografi örneğinde erkek medyanının 12-13 yıl (10-14 yıl aralığı) ile örtüşmektedir.
M1'in kökleri tamamlanmıştı ve apikal mineralizasyon zaten sona ermişti (erkeklerin medyanı 21, erkeklerin medyanı 11 yıl, 10-12 yıl aralığı). Hem üst M2'nin kısmen korunmuş alveolleri dişlerin zaten filizlendiğini gösteriyor, distal kök en az üçte ikisine kadar gelişti (Şekil 6; erkeklerin ortalaması 12,1 ± 1,1 yıl SD, medyanı 12 yıl; erkeklerin medyanı 12 yıl, 10-13 yıl aralığı). Weninger, iki üst M2'nin köklerinin henüz kapanmadığını, dişlerin yokluğu nedeniyle doğrulanması mümkün olmadığını belirtir. Sol M3'ün kriptinin dilsel duvarı iyi görünür ve M3'ün henüz filizlenmediğini gösterir (Şekil 6; erkeklerde alveolar çıkış > 18 yaş). Büyük bir İran ceset örneğinde erkekler için açık bir sfenobaziler sinkondrozun ortalama yaşı 12,3 ± 2,7 yıl SD olarak belirlenmiş ve yaş tahmini için güvenilir bir gösterge olarak kabul edilmiştir. Sekizgen kafatasında, ekto- (3,1 mm) ve endo- (4,3 mm) yüzeyde tamamen açık bir sinkondroz vardı (Şekil 3). Bu, erkeklerde tamamen kaynaşmanın önce endo-kranial kaynaşma ile başlayan 15 ila 19 yaş arasında olduğu bildirildiği için diş yaşını tamamen desteklemektedir. Dahası, 13 yaşından sonra erkeklerde asla açık sinkondroz gözlemlenmemiştir. Bu özelliğin beslenme, sağlık durumu ve büyüme oranından etkilenen büyük değişkenliğinden dolayı bazı yazarlar onu yaş belirlemesi için sınırlı olarak görürler.
Genel olarak, Sekizgen kafatasının diş durumu ve sfenobaziler sinkondroz gelişim aşaması, bireyin muhtemel bir yaş aralığı olan 11 ila 14 yıl önermektedir. Kafatası tahminimiz, post-kranyumdan elde edilen 15-17 yaş (11) ve kafatasının ilk tanımlayıcısı tarafından elde edilen 16-17 yaş değerinden daha genç bir yaşa işaret eder. Bununla birlikte, son iki bin yılda ortaya çıkabilecek gelişimsel farklılıkları veya çeşitli coğrafi popülasyonlar arasındaki farklılıkları dışlayamayız. Bununla birlikte, Sekizgen bireyinin erken ergenlik yerine geç ergenlikte olduğunu düşünmeyi son derece düşük buluyoruz.
Kafatasının tarihlemesi
Kafatasının radyokarbon tarihlemesi için petrosal kemiğinden kemik tozu aldık (Yöntemlere bakınız). Kemikler için örnek ön işlemi, kolajen ekstraksiyonu ve 29, 30'da özetlenen ultrafiltrasyon protokollerini takip etti. Ultrafiltrasyon sonrasında 260 mg kemikten 6,5 mg kolajen elde edildi (yüzde 2,5 verim). Örnek 14C aktivitesi, 31, 32'de gerçekleştirilen grafitasyon, hedef hazırlama ve AMS ölçümü ile ölçüldü.
Sonucu INTCAL20 (karasal) eğrisi33 kullanarak kalibre ettiğimizde, %95,4 olasılıkla 355–282 (58,4% olasılık) ve 231–170 MÖ (37,0% olasılık) aralığında bir kalibre edilmiş yaş elde ettik (Şekil S10). Çok modlu dağılım, bu dönemde kalibre eğrisindeki dalgalanmaların bir fonksiyonudur.
Kemik kolajeni δ13C ve δ15N değerleri, VPDB'ye göre ± 0,3 ppm hassasiyetle bağımsız olarak EA-IRMS (Element Analizörü/İzotop Oranı Kütle Spektrometresi) kullanılarak ölçüldü (Ek Bilgi Tablosu S2). Değerler (sırasıyla δ13C ve δ15N değerleri -19,1 ve 11,3‰), farklı radyokarbon depolarından alınan gıdaların beslenmesinden kaynaklanan bir rezervuar etkisinin olasılığını göstermektedir. Gerçek yaştan sapmaların kesin miktarını, yerel sitedeki diğer insanlar veya hayvanlardan izotopik kanıtlardan yoksun olarak tahmin etmek zordur. Radyokarbon tahminlerini düzeltmek için, ölçülen δ13C değerine dayanarak, bu örnekleme için elde ettiğimiz değerlere bağlı olarak, denizel gıda katkısının yaklaşık %21 olası olduğunu tahmin ederek bir uç nokta düzeltme yaklaşımı kullandık. Bu değişikliği nicelleştirmek için OxCal'da "Karışık_Eğriler" yaklaşımını kullandık, buna -142 ± 66 yıl (33, 34) bir ΔR değeri ekledik. Site konumundan karşılaştırma verilerinin olmaması ve bireyin kesin protein bileşenindeki varyasyon olasılığı nedeniyle denizel gıda tahmininde ± %10'luk bir belirsizlik de Bayesçi modelimize ekledik. %95,4 olasılıkla 205-36 MÖ (89,7%), 345-317 MÖ (4,8%) ve 12-1 MÖ (1%) aralıklarında bir kalibre edilmiş aralık elde ettik (Şekil S11) ve bu, kafatasının yaşının en iyi tahmini olarak kabul ediyoruz. Bu yaş, A.E. Lalonde AMS Laboratuvarı (Ottawa/Kanada, Yöntemlere bakın) tarafından femur orta bölümünden elde edilen ve kalibre edilmiş MÖ 48-MS 54 aralığında (95.4%) bir tarih aralığı veren önceki tarihleme sonuçlarıyla iyi uyumludur. Kanz ve meslektaşları da (12), Viyana Çevresel Araştırma Hızlandırıcı'sında (örnek VERA-4104) elde edilen MÖ 210-20 arasında bir radyokarbon tarihi raporlayarak (yüzde 94 olasılık) yukarıdaki düzeltilmiş sonuçlarımızla iyi bir uyum içindedir.
Kafatası ve post-kranyumdan elde edilen genetik sonuçlar
Cinsiyet, genomik köken ve üç farklı iskelet elemanının (kafatası, femur, kaburga) aynı bireye ait olup olmadığı gibi önemli soruları değerlendirmek için genetik analiz kullanıldı. Her öğe, Yöntemler bölümünde açıklandığı gibi ayrı ayrı örneklendiler ve işlediler. Elde edilen DNA'nın kalitesi ve doğruluğu, tekrarlanan okuma çıkarılmasından sonra her iskelet elemanı için endojene içerikleri hesaplanarak değerlendirildi; kaburga için %0,02, femur için %0,08 ve kafatası için %38,42, bu da sırasıyla 0,0002X, 0,0020X ve 1,6656X ortalama genom kapsamlarına yol açtı (Ek Bilgi Tablosu S4). Eski DNA'nın tipik bir özelliği olan deaminasyon kalıpları, üç öğenin geri kazanılan DNA'sının özgünlüğünü desteklemektedir; DNA dizilerinin 5' ucundaki terminal deaminasyon sıklıkları %13 (kaburga), %19 (femur) ve %25 (kafatası) olarak bulunmuştur (Ek Bilgi Şekil S12, Ek Bilgi Tablosu S4). Benzer şekilde, mitokondriyal35 ve X kromozomu okuma36'lardaki kirlilik tahminleri, kafatası için %1,71'in (95% GA 1,54–1,89) maksimum değerini vermiştir. Bu değer, genellikle kabul edilen eski DNA çalışmaları sınırının altında olan %5'in oldukça altındadır (Ek Bilgi Tablosu S4).
Genetik cinsiyet tahmini, kafatası ve femurun erkek bireylere ait olduğunu, kaburganın ise belirsizlikler olmasına rağmen muhtemelen erkek olduğuna dair hızlı bir şekilde ortaya koymuştur (Şekil 7C, Ek Bilgi Tablosu S4). Bununla birlikte, femur ve kaburga için mevcut verilerin sınırlı miktarı nedeniyle, sadece kafatası ve femur çifti, "Aynı/İkiz" tanımlanması için ilgili yöntemlerin minimum gereksinimlerini karşılayan yeterli örtüşen veriye sahipti. Her iki yöntemin sonuçları bu sınıflandırmada aynı fikirde olmuştur (Şekil 7D, Ek Bilgi Tablosu S5). Çok daha az örtüşen veriye rağmen, kafatası-kaburga çiftinde de benzer bir ilişki öne sürülmüştür, ancak bu iddiayı destekleyecek istatistiksel güç yoktur. Bununla birlikte, kaburga örneğinin mitokondriyal haplogrubu (H5'36), kafatasının ve femurun H5d'sine atasaldır ve kaburga ve kafatası arasında 9 polimorfizmden 7'sinin paylaşılması, bireylerin en azından potansiyel olarak yakından ilişkili olmaları için daha fazla destek sağlamaktadır (Ek Bilgi Tablosu S4). Eski nüfuslarda bu haplogruplar şu ana kadar Tunç Çağı Almanya'sında, Tunç Çağı İsrail'inden bir bireyde (40'taki I2198), Etrüsk İtalya'sından başka bir bireyde (41'deki VET001) ve son olarak Sardunya'dan bir Fenike bireyinde (42'deki MS10577) bulunmuştur.
Kafatası verileri üzerinde popülasyon genomik analizleri gerçekleştirerek, Sekizgen bireyinin atalarının olası coğrafi kökenini anlamaya çalıştık. Modern ve eski Batı Avrasyalıları içeren bir veri kümesinin ana bileşen analizi (PCA), Sekizgen bireyini Güney Avrupa'dan Tunç ve Demir Çağı genom varyasyonuna çok yakın bir yere yerleştirdi, bu durum İtalyan Yarımadası'ndan Etrüsk ve Roma İmparatorluğu bağlamından geri kazanılan bireyler ile örtüşüyordu (Şekil 7A). PCA'daki Etrüsk ve Erken Roma Cumhuriyeti bireylerinin konumuyla eşleşen, zaman ve mekan boyunca genetik benzerlik olasılık haritalarının belirlenmesini sağlayan yeni bir yöntem kullanarak, bu bireyin atalarının en yüksek benzerlik olasılığını MÖ 500 civarında İtalyan Yarımadası'nın orta bölgesi ile Sardunya adası arasında bulduk (Şekil 7B). Ölüm tarihine daha yakın zaman noktalarına, 14C aralığı 205-36 MÖ göz önüne alındığında, bölgede daha düşük benzerlik olasılıkları bulduk, ancak en yüksek benzerliğin nokta neredeyse coğrafi olarak değişmeden kaldı (Şekil 7B).
Sekizgen bireyinin İtalyan Yarımadası ve Sardunya popülasyonlarıyla olan benzerliklerinin istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar gösterip göstermediğini anlamak için, f4-istatistik testlerini f4(Mbuti.DG, Sekizgen-kafatası; Sardunya_BA_Nuragic, İtalya_IA_Cumhuriyet.SG/İtalya_Etrüsk) formu ile uyguladık. Sonuçlar, Sekizgen kafatasının Nuragic Sardunyalılara Etrüsk gruplara göre daha yakın olduğunu (−5,095 < Z < −2,730) gösterdi, oysa İtalya_IA_Cumhuriyet.SG için sonuç |Z| > 3 için istatistiksel olarak anlamlı değildi, ancak Sardunyalılarla daha fazla alel paylaşımı önerildi (Z = -2,329) (Ek Bilgi Tablosu S6). Bu sonuçlar, genetik benzerlik olasılık haritalarını destekliyor ve anakaradaki İtalya ve Sardunya arasındaki en yüksek benzerlik noktasının ara konumunu açıklıyor. Ayrıca, Sekizgen bireyinden Nuragic Sardunyalılardan daha yakın olan diğer İtalyan, İspanyol ve çeşitli Balkan grupları olup olmadığını kontrol ettik, ancak sonuçlar değişmedi. Bu, Batı Türkiye'den Hellenistik ve Roma dönemi bireylerini kullanan başka iki testte de aynıydı (−7,193 < Z < −6,116) (Ek Bilgi Tablosu S6).
Son olarak, popülasyon içindeki akrabalık için bir temsilci olarak, kafatası örneğinde 4 santimorgan'dan uzun ROH'ların (Homozigotluk Koşulları) olup olmadığını araştırmak için hapROH47 kullandık, ancak 4 santimorgan'dan uzun hiçbir segment bulamadık ve bu nedenle bu tür üreme pratiği için hiçbir destek yoktu (Ek Bilgi Şekil S16).
Genetik veriler, Sekizgen kafatasının erkek olduğunu ve bu nedenle Arsinoë IV'e ait olmadığını göstermektedir. Klinefelter sendromu veya diğer cinsiyet kromozomu bozuklukları gibi herhangi bir cinsiyet kromozomu bozukluğu belirtisi yoktur. Tüm genetik veriler, tek ebeveyn haplogrupları da dahil olmak üzere, yakın atalarının kökeninin İtalyan Yarımadası veya Sardunya'da olduğunu gösterir. Bu gerçekler, iki bin yıl önce Klasik Roma döneminde Efes'te yaşayan bir bireyle tamamen uyumludur. Sekizgen post-kranyal bulgularından elde edilen femurdan daha fazla genetik sonuç (kaburga parçası verilerinin yetersiz olduğu kanıtlandı), bu kemiklerin kafatasıyla aynı bireye ait olduğunu önermektedir. İzotopları dikkate alarak yapılan radyometrik 14C tarihlemesi, Arsinoë IV'in bildirilen yaşam dönemiyle uyumludur. Post-kranyumun lahitten ne zaman ve nasıl çıkarılıp Sekizgen'in farklı yerlerinde dağıtıldığı hala belirsizdir. Bu, 1929'daki Keil kazısı veya 1982'ye kadar herhangi bir zamanda olmuş olabilir. Keil, mezar odasının dikkatlice kapatıldığını doğruladı (s. 44), ancak post-kranyumun ne olduğu hakkında hiçbir şey söylemedi. Benzer şekilde, alt çene ve eksik dişlerin kaderi açık kaldı.
Kafatasının morfolojik incelemeleri, daha önceki çalışmalarla çelişmekte ve güçlü asimetri, deformasyon ve bozukluk belirtileri göstermektedir. En çarpıcı biçimde, üst çene gelişmemiş ve anormal şekilde dikey eğimlidir. Tüm kafatası bir bazal fleksiyon gösterir, sol oksipitomastoide sütür tamamen ortadan kalkmışken sağdaki hala tamamen açıktır, oksipital kondüller ciddi defektler gösterir ve alt çene fossaları kafatasının orta sagittal düzlemine göre aşırı bir açıda eğilmiştir. Sekizgen kafatası, coğrafi olarak çeşitli bir örneklemdeki kafatası morfolojik varyasyonunun tamamen dışında kalır, bu örneklemdeki en asimetrik olanıdır ve en düşük damak-foramen magnum açısını gösterir. Üst birinci molar, antagonistleriyle fonksiyonel bir kapanışa hiç girmemiş olduğunu gösteren herhangi bir kullanım belirtisi göstermezken, daha sonra filizlenen üst birinci premolar, alışılmadık bir dilsel yönelim ve yanak çıkıntılı tepesindeki aşınmadan ve ön ölüm sonrası kırıklar gösterir ki bu fonksiyonel aşırı yüklenme ve uygunsuz oklüzal ilişkilerden kaynaklanıyor olabilir. Üst çene kemerinin dikey yönü, alt çene fossalarının güçlü eğimi ve dişlerin aşınma durumu, gelişmemiş alt çene, geriye doğru alt çene ilişkisi ve çiğneme bozukluklarını önermektedir. Dişlerin gelişim aşaması ve sfenobaziler sinkondrozuna göre, bireyin ölüm anındaki tahmini yaş 11 ile 14 yıl arasında belirlenebilir.
Genellikle, asimetri ve hipoplazi, gelişme boyunca yaşanan genetik ve çevresel baskıları yansıtır. Gelişimsel stres ve istikrarsızlık, post-kranyum ve kafatası hakkındaki daha önceki bulgularla geçici olarak çelişmektedir. Weninger, Sekizgen bireyini "…antik yüksek kültür dünyasının rafine, özel bir tipi…", ve "…çok saygın bir kişilik…" olarak görüyordu (s. 168). Verilerimiz sosyal statü hakkında çıkarımlarda bulunmak için kullanılamaz, ancak bu kafatasının gelişiminin önemli sorunlar ve bozukluklarla birlikte olduğunu, bu da herhangi bir sosyal sınıfla uyumlu olduğunu gösterdik. Kafatası sonuçlarımız, post-kranyal analizde hastalık ve stres belirtileri bulunmadığı görülen sonuçlarla